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毒物分析实验室的晨光比往日更显柔和,透过窗户洒在操作台面上,将高效液相色谱仪(hpLc)的银色机身镀上一层暖边。宋清砚站在台前,指尖轻轻抚过仪器的进样口,昨天小林教他的操作步骤在脑海中清晰回放 —— 样品前处理的蛋白沉淀、离心转速的设定、流动相的梯度配比,每一个细节都像刻在纸上般分明。今天,他要独立完成李建国胃内容物留样的毒物复检,确认是否存在除地西泮外的其他隐蔽毒物,这既是对之前检测结果的验证,也是小林对他 “技术助教” 指导成果的检验。

“陆哥,今天复检的是李建国胃内容物留样,重点确认两点:一是地西泮浓度是否与之前一致,排除检测误差;二是筛查有没有其他镇静类毒物,比如氯硝西泮、劳拉西泮,避免漏检联合下毒的可能。” 小林推着装有样品的转运箱走进来,箱子里放着密封的胃内容物离心管、无菌滤膜和进样瓶,“样品已经解冻,你按照昨天教的流程来,我在旁边看着,有问题随时问。”

宋清砚点点头,接过离心管 —— 管内淡褐色的胃内容物还带着轻微沉淀,是之前检测时留存的 1mL 样品。他回忆起样品前处理的步骤,先在通风橱内取出 500μL 胃内容物,加入等体积的乙腈(蛋白沉淀剂),用移液枪反复吹吸三次,确保充分混合。“移液枪要垂直,避免液体挂壁,不然浓度会不准。” 小林在一旁轻声提醒,目光落在他握枪的姿势上。宋清砚调整手腕角度,让移液枪与离心管保持垂直,液体顺畅地吸入枪头,没有出现挂壁痕迹。

将混合液放入离心机时,他特意核对了转速和时间 ——4000rpm,10 分钟,这是昨天小林强调的 “蛋白沉淀最佳参数”,能彻底分离胃内容物中的蛋白质和上清液。离心机启动后,宋清砚开始准备滤膜和进样瓶,他拿起一片 0.22μm 的有机相滤膜,想起昨天的疑问,转头问小林:“为什么这里要用 0.22μm 滤膜,而不是 0.45μm 的?之前处理血液用的是 0.45μm 的。”

“胃内容物杂质更多,比如未消化的食物颗粒,0.22μm 滤膜能截留更小的杂质,避免堵塞色谱柱。” 小林指着色谱柱温箱,“咱们用的 c18 柱内径只有 4.6mm,柱内填料是 5μm 颗粒,一旦有大杂质进去,柱子就废了,后续检测结果也会失真。” 宋清砚恍然大悟,将滤膜小心地装在过滤头上,动作比昨天更熟练,没有出现滤膜褶皱的情况。

离心结束后,上清液呈淡黄色,澄清透明。宋清砚用注射器吸取上清液,缓慢推入过滤头,滤液顺畅地流入进样瓶,没有出现堵塞。“不错,过滤速度很均匀,说明你推注的力度控制得正好。” 小林的声音里带着认可,“之前有实习生推得太急,滤膜直接破了,样品全废了。” 宋清砚闻言,更加放缓了推注速度,确保每一滴滤液都经过充分过滤。

接下来是 hpLc 的参数设置,这是独立操作的核心环节。宋清砚走到操作台前,打开之前保存的 “地西泮检测方法”,却没有直接沿用,而是根据胃内容物的特性调整参数:“胃内容物可能有其他干扰成分,我把初始流动相乙腈比例从 30% 降到 25%,梯度洗脱时间从 10 分钟延长到 15 分钟,这样能让地西泮和其他可能的毒物更好分离。” 他一边说,一边在界面上修改参数:tR 4500ms,tE 100ms,检测波长 230nm(地西泮的特征吸收波长),柱温 30c,流速 1.0mL\/min。

小林凑过来查看,眼中闪过惊喜:“你还考虑到干扰成分了!确实,胃内容物里的食物残渣可能会影响峰形,延长洗脱时间能让不同成分的保留时间拉开差距,避免峰重叠。这个调整很专业。” 得到肯定,宋清砚更加笃定,点击 “保存方法”,将新参数命名为 “胃内容物地西泮检测 - 0725”。

进样环节,宋清砚将进样瓶放入自动进样器,仔细核对瓶位编号,确保与方法中的样品信息对应。按下 “开始” 按钮后,他没有离开操作台,而是紧盯着显示屏上的基线变化 —— 起初基线平稳,随着流动相梯度变化,基线轻微波动,这是正常现象。10 分钟时,第一个峰在保留时间 6.7 分钟处出现,峰形对称,无拖尾,与地西泮标准品的保留时间完全一致。

“开始积分计算浓度!” 小林提醒道。宋清砚点击 “积分” 按钮,屏幕上自动生成峰面积,对应的浓度为 0.032μg\/mL,与之前检测的 0.03μg\/mL 误差小于 1%,在允许范围内。“浓度一致,说明之前的检测没有误差,地西泮含量准确。” 他轻声说,目光继续盯着屏幕,筛查后续是否有其他峰出现。

直到 15 分钟洗脱结束,显示屏上除了地西泮的峰,没有其他明显的高信号峰,排除了氯硝西泮、劳拉西泮等其他镇静毒物的存在。“太好了,没有联合下毒,张磊就是单独用了地西泮,和他的口供一致!” 小林兴奋地说,“你这次独立操作完全没问题,从样品前处理到参数调整,再到结果分析,一步都没出错,比我第一次独立操作时还稳!”

宋清砚看着屏幕上的色谱图,心中涌起一股踏实的成就感。从第一次面对 hpLc 时的生涩,到现在能根据样品特性调整参数,解决滤膜选择、峰形优化的问题,每一个进步都离不开小林的指导,也离不开对案件细节的关注 —— 正是因为要确认李建国是否被联合下毒,他才会主动调整洗脱时间,确保没有漏检,让验毒流程真正服务于案件真相。

“其实还有个小问题,” 宋清砚忽然指着色谱图末尾的微小波动,“这里有个很小的杂峰,保留时间 14.2 分钟,信号强度很低,会不会是食物成分干扰?” 小林凑近查看,放大后发现杂峰的信号强度远低于检测限,笑着解释:“这是胃内容物里的脂肪成分,不是毒物,你连这么小的杂峰都注意到了,细节把控得太到位了!”

确认结果无误后,宋清砚开始整理数据报告,将检测方法、参数设置、峰面积、浓度结果一一记录,最后在 “结论” 栏写下:“李建国胃内容物留样中检出地西泮,浓度 0.032μg\/mL,与首次检测结果一致,未检出其他镇静类毒物,排除联合下毒可能。” 报告末尾,他特意标注了 “独立操作完成,指导人:小林”,体现对小林帮助的认可。

“陆哥,你这次报告写得比之前更规范了,连参数调整的原因都备注了,以后检察院看报告的时候能更清楚咱们的检测逻辑。” 小林接过报告,翻到参数设置页,“比如你写‘延长洗脱时间至 15 分钟以排除食物干扰’,这就解释了为什么和首次检测参数不同,避免后续质疑。”

宋清砚点点头,目光落在 hpLc 上 —— 仪器已经完成清洗程序,色谱柱在柱温箱中恒温保存,进样器也自动清洁完毕。他想起第一次学用这台仪器时,连流动相比例都要反复确认,现在却能独立完成从样品处理到报告撰写的全流程,不仅掌握了设备操作,更理解了每一步操作背后的案件意义 —— 验毒不是单纯的技术流程,而是通过精准数据排除疑问,巩固证据链,让李建国案的下毒事实无可辩驳。

“这次复检不仅确认了地西泮浓度,还排除了联合下毒,相当于给案件的毒物环节上了双保险。” 沈驰不知何时走进实验室,手里拿着刚收到的张磊补充口供,“张磊刚承认只买了地西泮,没和其他药混用,和咱们的检测结果完全对应!现在毒物这块彻底没问题了,证据链又加固了一环。”

宋清砚接过口供记录,看到张磊写下 “只买了地西泮片,一片 0.5mg,放了两片在水里”,与检测出的浓度完全吻合,心中更加确定 —— 独立完成的验毒流程,不仅是对自己技术的检验,更是对案件真相的负责,每一个数据都在无声地印证口供,让真凶的谎言无处遁形。

离开实验室时,宋清砚回头看了一眼 hpLc,显示屏上还停留着地西泮的色谱图,对称的峰形像一道坚实的证据,支撑着案件的真相。他知道,这次独立验毒的完成,意味着他从 “跟着学” 真正走到了 “独立做”,未来再遇到类似的毒物检测,他能更自信地运用设备,为案件提供精准数据。而小林的帮助,不仅教会了他操作技巧,更让他明白,现代法医的成长,是在互助与实践中不断进步,用每一次精准的检测,践行 “为生者权,为死者言” 的使命。

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